生物分析色譜柱實驗中易發(fā)生降解,原因幾何?
某些補充氨基酸標準品在HCl中易發(fā)生降解,特別是谷氨酰胺和天冬酰胺,正因為如此,所以通常使用去離子水進行配制,也就是說標準配制方法不同。正確做法是將補充氨基酸溶解于去離子水中,如果將它們與其他氨基酸混合使用,則需要注意它們?nèi)芙庥谙←}酸中,因此需要快速使用。
此外,還注意到其他氨基酸將在酸水解條件下發(fā)生降解。其中包括色氨酸和4-羥基脯氨酸。然而,它們的降解機理不同。
請注意兩種氨基酸中的酰胺基團。當這些基團暴露在酸中時,將水解釋放出氨。
那么機理的來源究竟是什么呢?
由于質(zhì)子H+首先進攻酰胺的羰基氧O開始,然后經(jīng)過水合以及脫氨NH3,完成整個水解過程。經(jīng)過水解,原本的酰胺變成羧酸和游離的氨。
總之,分析的癥結就是在于補充氨基酸不穩(wěn)定容易在酸中水解,如果您正在從事相關的實驗,一定要注意樣品前處理不要犯錯哦。
生物分析色譜柱大大提高了生物色譜的性能和效率。希望這樣的用戶交流能夠進一步推動技術的進展,以及了解客戶的應用。生物分析色譜柱的技術優(yōu)勢和方法已廣泛地應用于各個領域,其*達80%。
生物分析色譜柱到底能不能反沖?如果色譜柱兩端的篩板孔徑相同反沖是不會有什么問題的,從填料流失的角度來說,粒徑為5um,而篩板孔徑為2um,這種情況下正沖反沖都不會造成填料的流失;此外,從柱子裝填的角度來說,裝柱時是按照與柱身箭頭相反的方向裝填的,與反沖時的液體流路方向相同。